Rekombinante Protein Expression

Durch die Verwendung vielfältiger Expressionssysteme, inklusive bakterieller, Insekten- oder Säugetier- Expressionssysteme hat ALNA BIOSCIENCE die Möglichkeit auch schwierig zu exprimierende Proteine im Milligramm-Maßstab zu produzieren. Unabhängig davon ob Sie sich der Leitsubstanzfindung, Testsystementwicklung, Vakzine-Produktion, Hochdurchsatz-Screening oder der Charakterisierung von Genprodukten widmen wollen, können wir für Sie die Lösung des Problems finden. Wir können für Sie eine breite Palette von Protein-Expressions-Systemen in hoher Qualität mittels bakterieller, Hefe-, baculovirus-/Insektenzell-, sowie Säugetierzell-Systeme bereitstellen und im Klein- bis Großmaßstab realisieren. E. Coli Expression Transformation des Expressionsvektors in E.coli Screening und Selektion von positiven Klonen Evaluation der Expression durch SDS-PAGE or Western Blotting Optimierung der Wirtszellen im Kleinmaßstab und Analyse in verschiedenen E.coli-Wirtsstämmen. Wachstums- und Expressions-Optimierung durch verschiedene Induktionsmittel, Temperatur, Zelldichte, Kultivierungszeiten, Antibiotika, und Medien, um geringe Produktivitäten und unlösliche Proteinaggregate zu vermeiden. Isolierung und Präparation von Inclusion-Bodies Zellernte und Aufschluss Baculovirus Expression Transfektion von Insektenzellen, sowie Synthese und Bereitstellung von rekombinanten Insektenviren. Virusproduktion und Plaque-Reinigung Versuchsexpression mit rekombinanter Virus-Klonen Vervielfältigung und Reinigung von rekombinanter Baculoviren. Virus Titer-Bestimmung und Bereitstellung von hochtitrigen Virus-Stamm-Mengen Expressions-Optimierung von Sf9 oder HiFive Zellen bei verschiedenen Temperaturen, MOI, Wachstumsbedingungen, Medien, Löslichkeitsbestimmungen Massenkulturen und Proteinreinigung Zell- bzw. Biomasse- Gewinnung ( auch aus konditionierten Medien) und Aufschluss- bzw. Lysat-Präparation Hochdurchsatz-Screening Ihrer Plasmid-Konstrukte nach Ihren Auswahlkriterien Produktion von hochtitrigen Virusmengen schon in einer Woche Großfermentation Hochdichte-Zellproduktion vom Schüttelkolben bis zum Bioreaktor Zellgewinnung durch Durchfluss- und/oder Hochgeschwindigkeits-Zentrifugation Niedertemperatur-, schaumfreie Hochdruckdispersion für Zellaufschluss bzw. Lysesystem Leistungsdaten für die verwendeten Expressions-Systeme System Kapazität Bakterien Bereitstellung von transformierter Bakterienbiomasse (feucht) bis zum 3-Tonnenmaßstab Bereitstellung homogener rekombinanter Proteine mit b > 98 % Reinheit, für die Kristallisation sowie partiell gereinigter rekombinanter Proteine mit > 70 % Reinheit. Hefe Bereitstellung von transformierter Hefebiomasse für die Grobfermentation bis in den 3Tonnen-Maßstab Bereitstellung von homogener rekombinanter Proteine mit Reinheit > 98 %, z.B. für die Kristallisation Bereitstellung teilweise gereinigter Protein mit einer Reinheit von > 70 Bereitstellung von Großmengen an Protein, bis zu 1 kg Baculovirus-Insektenzellen Bereitstellung von hochtitrigen rekombinanter Virus-Mengen mit bis zu n109 pfu/ml, welche das gewünschte Kunden-Gen enthalten Bereitstellung homogener rekombinanter Protein mit Reinheit > 98 %; z.B. für die Kristallisation Bereitstellung teilgereinigter Protein mit einer Reinheit > 70 % Bereitstellung von Großmengen an Protein, bis zu 1 kg Bereitstellung einer Option zur Herstellung von Proteinen